Κάνουμε επίσης πειράματα PCR, γιατί τα αποτελέσματα είναι πάντα πολύ χειρότερα από άλλα;

Κάνουμε επίσης πειράματα PCR, γιατί τα αποτελέσματα είναι πάντα πολύ χειρότερα από άλλα;

Στο εργαστήριο, δείτε την PCR άλλων ανθρώπων, η απόδοση ενίσχυσης είναι υψηλή, η λωρίδα ηλεκτροφόρησης είναι τέλεια και κοιτάξτε τη δική τους, δύσκολη για μεγάλο χρονικό διάστημα, αισθανθείτε ότι η αντίδραση είναι πολύ καλή, το αποτέλεσμα μιας ψευδώς θετικής δοκιμής …… το πρόβλημα?

Πιστεύω ότι πολλοί από τους συνεργάτες μας αντιμετώπισαν επίσης διάφορα προβλήματα. Όταν συναντάμε ένα τείχος σε πειράματα PCR, θα αναλύσουμε υποσυνείδητα τους παράγοντες μέσα στο σύστημα αντίδρασης, αλλά συχνά αγνοούμε τη σημαντική επίδραση των αναλώσιμων στα πειράματα.

Το αποτέλεσμα PCR σας είναι λάθος, τα αναλώσιμα PCR μπορεί να είναι ο βασικός λόγος. Αφενός, η μικρο μόλυνση των αναλωσίμων ή η εισαγωγή αναστολέων θα προκαλέσει πειραματική ρύπανση. Από την άλλη πλευρά, η ακατάλληλη επιλογή αναλωσίμων θα κάνει επίσης τα πειραματικά αποτελέσματα να υποφέρουν.

Το πρόβλημα έρχεται ξανά. Υπάρχουν πολλοί τύποι αναλώσιμων PCR, οπότε πώς να επιλέξετε τα σωστά για να κάνετε το πείραμα πιο ομαλό; Σε ποια προβλήματα πρέπει να δοθεί προσοχή; Μην ανησυχείτε σήμεραI σε συνδυασμό με πολυετή εμπειρία, διαλογή κοινών προβλημάτων επιλογής αναλώσιμων PCR, ελπίζω να σας βοηθήσω.

 

Ε1: Γιατί τα αναλώσιμα PCR συνήθως κατασκευάζονται από υλικό PP;

Huida: Επειδή οι προμήθειες PCR είναι συνήθως σε άμεση επαφή με αντιδραστήρια ή δείγματα, τα υλικά πολυπροπυλενίου (PP) είναι βιολογικά αδρανή, δεν προσκολλώνται στα βιομόρια και έχουν καλή χημική ανοχή και ανοχή θερμοκρασίας (μπορεί να κλείσουν αυτόματα στους 121 ° C, μπορεί επίσης να αντέξει αλλαγές θερμοκρασίας κατά τη διάρκεια του θερμικού κύκλου).

 

Ε2: Πώς πρέπει να επιλέξω μεταξύ διαφορετικών μεγεθών σωλήνων / πλακών PCR;

HUIDA: Σκοπός της επιλογής: επιλέξτε τα σωστά προϊόντα σύμφωνα με τις συγκεκριμένες πειραματικές απαιτήσεις. Το μεγαλύτερο μέρος του μεγέθους του σωλήνα PCR μπορεί να πληροί τις απαιτήσεις της αντίδρασης PCR. Σε αυτή τη βάση, συνιστάται να επιλέξετε πρώτα το σωλήνα χαμηλού όγκου. Επειδή ο σωλήνας / πλάκα αντίδρασης χαμηλού όγκου έχει μικρό εναέριο χώρο, η θερμική αγωγιμότητα βελτιώνεται και η εξάτμιση μειώνεται. Ταυτόχρονα, είναι απαραίτητο να αποφευχθεί η προσθήκη υπερβολικών ή πολύ μικρών δειγμάτων. Πολύ μπορεί να οδηγήσει σε μειωμένη θερμική αγωγιμότητα, διαρροή και διασταυρούμενη μόλυνση, ενώ πολύ λίγα μπορεί να οδηγήσουν σε απώλεια εξάτμισης δείγματος.

Προδιαγραφές και όγκοι κοινών σωλήνων αντίδρασης:

Μονός / συνδυασμένος σωλήνας: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

Πλάκα 96 φρεατίων: 0,2 ml, 0,15 ml

Πλάκα 384 φρεατίων: 0,04 ml

 

Ε3: Όταν η ποσότητα του δείγματος είναι μικρή, θα επιλέξω μονό σωλήνα ή συνδυασμένο σωλήνα, αλλά γιατί κάποιοι έχουν επίπεδο κάλυμμα και κάποιοι έχουν κυρτό κάλυμμα;

Huida: Όταν η ποσότητα του δείγματος είναι μικρή, προτιμάται ο μοναδικός σωλήνας ή ο συνδυασμένος σωλήνας. Ωστόσο, όταν ο όγκος της αντίδρασης είναι μεγάλος, ο μονός σωλήνας είναι κυρίαρχος και ο όγκος μπορεί να φτάσει τα 0,5 mL. Και το επίπεδο κάλυμμα και το κυρτό κάλυμμα έχουν το πλεονέκτημα, το συγκεκριμένο μπορεί να αναφέρεται στις ακόλουθες πληροφορίες.

Μονός σωλήνας: 0,2 ml και 0,5 ml. Μπορεί να επιλέξει την ποσότητα δείγματος με ευελιξία.

Συνδετικός σωλήνας: 0,2 ml ή 0,15 ml είναι προαιρετικό. 8 ή 12 σωλήνες είναι κοινά.

Επίπεδο κάλυμμα: μπορεί να παρέχει ακριβή μετάδοση σήματος φθορισμού για qPCR. Εύκολο να γράψετε σήματα.

Κυρτό κάλυμμα: επαφή με το θερμό κάλυμμα του οργάνου PCR για μείωση της παραμόρφωσης του σωλήνα αντίδρασης που προκαλείται από πίεση. Ωστόσο, θα επηρεάσει τη μετάδοση σήματος φθορισμού και δεν μπορεί να εφαρμοστεί στο πείραμα qPCR.

 

Ε4: Γιατί μερικές πλάκες PCR έχουν φούστες και μερικές όχι;

Huida: Στην πραγματικότητα, η φούστα της πλάκας PCR έχει σχεδιαστεί για καλύτερη προσαρμογή σε εφαρμογές αυτοματισμού, παρέχοντας σταθερή υποστήριξη και μηχανική αντοχή για το όργανο, καθώς και υψηλότερη σταθερότητα κατά τη διάρκεια της διαδικασίας πιπέτας.

Οι πλάκες PCR διαιρούνται γενικά σε μη αιμαλίνη, μισό ημικύγραμμο και πλήρες στρίφωμα.

Χωρίς Πλάκα: Κατάλληλο για τα περισσότερα μηχανήματα PCR ή μηχανήματα qPCR, αλλά όχι για εφαρμογές αυτοματισμού. Η σταθερότητα δεν είναι υψηλή κατά τη διαδικασία της πίεσης, γι 'αυτό πρέπει να χρησιμοποιηθεί με στήριξη πλάκας.

Μισή πλάκα με άκρη: μπορεί να προσαρμοστεί στην εφαρμογή ετικέτας ή γραμμικού κώδικα, και στην αυτόματη εφαρμογή, και έχει καλή σταθερότητα στο σιφώνιο.

Πλήρης πλάκα με άκρη φούστα: πολύ κατάλληλη για αυτοματοποιημένες πειραματικές εφαρμογές, μπορεί επίσης να προσαρμοστεί στην ετικέτα και την εφαρμογή γραμμικού κώδικα. Έχει καλή μηχανική αντοχή, μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε όργανο PCR με διόγκωση, και έχει υψηλή σταθερότητα στη διαδικασία της πίεσης.

 

Ε5 :Για πλάκες PCR, γιατί οι γωνίες και οι ετικέτες δεν είναι οι ίδιες;

Huida: Εξαρτάται από την επίδραση της κοπής γωνίας και της σήμανσης.

Κοπή γωνίας: Η επιλογή της θέσης κοπής γωνίας της πλάκας PCR εξαρτάται από τις απαιτήσεις του κατάλληλου οργάνου για εύκολη τοποθέτηση.

Αναγνώριση: Οι αλφαριθμητικοί δείκτες στις πλάκες PCR βοηθούν στον εντοπισμό μεμονωμένων πηγαδιών και τοποθεσιών δειγμάτων. Γενικά για το ανάγλυφο έγχρωμο ψηφιακό λογότυπο ή το χαραγμένο λογότυπο. Για ορισμένες αυτοματοποιημένες εφαρμογές, οι τυπωμένες και επισημασμένες πλάκες αντίδρασης είναι καλύτερα σφραγισμένες.

 

Ε6: Γιατί ορισμένες πλάκες PCR είναι κυρτές ενώ άλλες είναι επίπεδες; Ποιό είναι καλύτερο?

Huida: Αυτό που ταιριάζει είναι καλύτερο. Υπάρχουν δύο είδη κοινών πλακών PCR: περιθώριο επίπεδου πόρου και υψηλό περιθώριο πόρων.

Πλάκα αντίδρασης περιθωρίου επίπεδης οπής, κατάλληλη για τις περισσότερες συσκευές PCR.

Οι πλάκες αντίδρασης με άνοδο των ακμών στομίου διευκολύνουν τη στεγανοποίηση της μεμβράνης και μειώνουν τον κίνδυνο διασταυρούμενης μόλυνσης μεταξύ των δειγμάτων.

 

Η Huida έχει πολυετή εμπειρία στην παραγωγή και επεξεργασία προϊόντων PCR και υψηλών προδιαγραφών στη βιομηχανία. Η σειρά προϊόντων είναι πλούσια και μπορεί να καλύψει τη συντριπτική πλειοψηφία των πειραματικών εφαρμογών PCR. Ελάτε να επιλέξετε τα σωστά προϊόντα για τις πειραματικές εφαρμογές σας.

谷歌推广疫情产品PCR


Ώρα δημοσίευσης: Ιουν-03-2021