Κάνουμε επίσης πειράματα PCR, γιατί τα αποτελέσματα είναι πάντα τόσο χειρότερα από άλλα;

Κάνουμε επίσης πειράματα PCR, γιατί τα αποτελέσματα είναι πάντα τόσο χειρότερα από άλλα;

Στο εργαστήριο, κοιτάξτε την PCR άλλων ανθρώπων, η απόδοση ενίσχυσης είναι υψηλή, η λωρίδα ηλεκτροφόρησης είναι τέλεια και κοιτάξτε τη δική τους, δύσκολο να γίνει για μεγάλο χρονικό διάστημα, αισθανθείτε ότι η αντίδραση είναι πολύ καλή, το αποτέλεσμα μιας ψευδώς θετικής δοκιμής…… Τι είναι το πρόβλημα?

Πιστεύω ότι πολλοί από τους συνεργάτες μας έχουν επίσης αντιμετωπίσει διάφορα προβλήματα.Όταν συναντάμε έναν τοίχο σε πειράματα PCR, θα αναλύσουμε υποσυνείδητα τους παράγοντες μέσα στο σύστημα αντίδρασης, αλλά συχνά αγνοούμε τη σημαντική επίδραση των αναλωσίμων στα πειράματα.

Το αποτέλεσμα PCR σας είναι λάθος, τα αναλώσιμα PCR μπορεί να είναι ο βασικός λόγος.Από τη μία πλευρά, η μικρομόλυνση των αναλωσίμων ή η εισαγωγή αναστολέων θα προκαλέσει πειραματική ρύπανση.Από την άλλη πλευρά, η ακατάλληλη επιλογή αναλώσιμων θα προκαλέσει επίσης προβλήματα στα πειραματικά αποτελέσματα.

Το πρόβλημα έρχεται ξανά.Υπάρχουν πολλοί τύποι αναλώσιμων PCR, οπότε πώς να επιλέξετε τα σωστά για να κάνετε το πείραμα πιο ομαλό;Ποια είναι τα προβλήματα στα οποία πρέπει να δοθεί προσοχή;Μην ανησυχείς, σήμεραI σε συνδυασμό με την πολυετή εμπειρία, την επίλυση της επιλογής αναλώσιμων PCR κοινά προβλήματα, ελπίζω να σας βοηθήσω.

 

Ε1: Γιατί τα αναλώσιμα PCR είναι συνήθως κατασκευασμένα από υλικό PP;

Huida: Επειδή τα αναλώσιμα PCR έρχονται συνήθως σε άμεση επαφή με αντιδραστήρια ή δείγματα, τα υλικά πολυπροπυλενίου (PP) είναι βιολογικά αδρανή, δεν προσκολλώνται στα βιομοριακά και έχουν καλή χημική ανοχή και ανοχή θερμοκρασίας (μπορεί να γίνει αυτόματου κλεισίματος στο 121° C, μπορεί επίσης να αντέξει τις αλλαγές θερμοκρασίας κατά τη διάρκεια του θερμικού κύκλου).

 

Ε2: Πώς πρέπει να επιλέξω μεταξύ διαφορετικών μεγεθών σωλήνων/πλακών PCR;

HUIDA: Σκοπός επιλογής: επιλέξτε τα σωστά προϊόντα σύμφωνα με τις συγκεκριμένες πειραματικές απαιτήσεις.Το μεγαλύτερο μέρος του μεγέθους του σωλήνα PCR μπορεί να ικανοποιήσει τις απαιτήσεις της αντίδρασης PCR.Σε αυτή τη βάση, συνιστάται να επιλέξετε πρώτα το σωλήνα χαμηλού όγκου.Επειδή ο σωλήνας/πλάκα αντίδρασης χαμηλού όγκου έχει μικρό υπερκείμενο χώρο, η αγωγιμότητα θερμότητας βελτιώνεται και η εξάτμιση μειώνεται.Ταυτόχρονα, είναι απαραίτητο να αποφευχθεί η προσθήκη πολλών ή πολύ λίγων δειγμάτων.Η υπερβολική ποσότητα μπορεί να οδηγήσει σε μειωμένη θερμική αγωγιμότητα, διαρροή και διασταυρούμενη μόλυνση, ενώ πολύ λίγο μπορεί να οδηγήσει σε απώλεια εξάτμισης του δείγματος.

Προδιαγραφές και όγκοι κοινών σωλήνων αντίδρασης:

Μονός/συνδυασμένος σωλήνας: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

Πλάκα 96 φρεατίων: 0,2 ml, 0,15 ml

Πλάκα 384 φρεατίων: 0,04 ml

 

Ε3: Όταν η ποσότητα του δείγματος είναι μικρή, θα επιλέξω μονοσωλήνα ή συνδυασμένο σωλήνα, αλλά γιατί κάποιοι έχουν επίπεδο κάλυμμα και κάποιοι έχουν κυρτό κάλυμμα;

Huida: Όταν η ποσότητα του δείγματος είναι μικρή, προτιμάται ο μεμονωμένος σωλήνας ή ο συνδυασμένος σωλήνας.Ωστόσο, όταν ο όγκος της αντίδρασης είναι μεγάλος, ο απλός σωλήνας είναι κυρίαρχος και ο όγκος μπορεί να φτάσει τα 0,5 mL.Και το επίπεδο κάλυμμα και το κυρτό κάλυμμα το καθένα έχει το πλεονέκτημα, συγκεκριμένα μπορεί να αναφερθεί στις ακόλουθες πληροφορίες.

Μονό σωληνάριο: 0,2 ml και 0,5 ml.Μπορεί να επιλέξει την ποσότητα δείγματος με ευελιξία.

Σωλήνας σύνδεσης: 0,2 ml ή 0,15 ml είναι προαιρετικό.8 ή 12 σωλήνες είναι συνηθισμένοι.

Επίπεδο κάλυμμα: μπορεί να παρέχει ακριβή μετάδοση σήματος φθορισμού για qPCR.Εύκολη εγγραφή σημάτων.

Κυρτό κάλυμμα: επαφή με το θερμό κάλυμμα του οργάνου PCR για μείωση της παραμόρφωσης του σωλήνα αντίδρασης που προκαλείται από την πίεση.Ωστόσο, θα επηρεάσει τη μετάδοση του σήματος φθορισμού και δεν μπορεί να εφαρμοστεί στο πείραμα qPCR.

 

Ε4: Γιατί ορισμένες πλάκες PCR έχουν φούστες και κάποιες όχι;

Huida: Στην πραγματικότητα, το περίβλημα της πλάκας PCR έχει σχεδιαστεί για να προσαρμόζεται καλύτερα σε εφαρμογές αυτοματισμού, παρέχοντας σταθερή στήριξη και μηχανική αντοχή για το όργανο, καθώς και υψηλότερη σταθερότητα κατά τη διαδικασία της πιπέτας.

Οι πλάκες PCR γενικά διακρίνονται σε μη άκρου, μισής γραμμής και πλήρους άκρου.

ΧωρίςΠλάκα: Κατάλληλο για τις περισσότερες μηχανές PCR ή μηχανές qPCR, αλλά όχι για εφαρμογές αυτοματισμού.Η σταθερότητα δεν είναι υψηλή κατά τη διαδικασία της πιπέτας, επομένως πρέπει να χρησιμοποιείται με υποστήριξη πλάκας.

Πλάκα άκρων μισής φούστας: μπορεί να προσαρμοστεί στην εφαρμογή ετικετών ή γραμμωτού κώδικα και αυτόματη εφαρμογή και έχει καλή σταθερότητα με πιπέτα.

Πλήρης πλάκα άκρης φούστας: πολύ κατάλληλο για αυτοματοποιημένες πειραματικές εφαρμογές, μπορεί επίσης να προσαρμοστεί στην ετικέτα και την εφαρμογή του γραμμικού κώδικα.Έχει καλή μηχανική αντοχή, μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε όργανο PCR μονάδας διόγκωσης και έχει υψηλή σταθερότητα στη διαδικασία της πιπέτας.

 

Q5 :Για τις πλάκες PCR, γιατί οι γωνίες και οι ετικέτες δεν είναι ίδιες;

Huida: Εξαρτάται από το αποτέλεσμα της γωνιακής κοπής και της σήμανσης.

Κοπή γωνίας: Η επιλογή της γωνιακής θέσης κοπής της πλάκας PCR εξαρτάται από τις απαιτήσεις του κατάλληλου οργάνου για εύκολη τοποθέτηση.

Αναγνώριση: Οι αλφαριθμητικοί δείκτες σε πλάκες PCR βοηθούν στον εντοπισμό μεμονωμένων φρεατίων και θέσεων δειγμάτων.Γενικά για το ανάγλυφο έγχρωμο ψηφιακό λογότυπο ή το χαραγμένο λογότυπο.Για ορισμένες αυτοματοποιημένες εφαρμογές, οι τυπωμένες και επισημασμένες πλάκες αντίδρασης είναι καλύτερα σφραγισμένες.

 

Ε6: Γιατί ορισμένες πλάκες PCR είναι κυρτές ενώ άλλες είναι επίπεδες;Ποιό είναι καλύτερο?

Huida: Αυτό που ταιριάζει είναι καλύτερο.Υπάρχουν δύο είδη κοινών πλακών PCR: επίπεδο περιθώριο πόρων και υψηλό περιθώριο πόρων.

Πλάκα αντίδρασης περιθωρίου επίπεδης οπής, κατάλληλη για τις περισσότερες συσκευές PCR.

Οι πλάκες αντίδρασης με ανερχόμενα άκρα στομίου διευκολύνουν τη σφράγιση της μεμβράνης και μειώνουν τον κίνδυνο διασταυρούμενης μόλυνσης μεταξύ των δειγμάτων.

 

Η Huida έχει πολυετή εμπειρία στην παραγωγή και επεξεργασία προϊόντων PCR και βιομηχανικά υψηλά πρότυπα.Η σειρά προϊόντων είναι πλούσια και μπορεί να καλύψει τη συντριπτική πλειοψηφία των πειραματικών εφαρμογών PCR.Ελάτε να επιλέξετε τα κατάλληλα προϊόντα για τις πειραματικές σας εφαρμογές.

谷歌推广疫情产品PCR


Ώρα δημοσίευσης: Ιουν-03-2021

Στείλτε μας το μήνυμά σας:

Γράψτε το μήνυμά σας εδώ και στείλτε το σε εμάς